Aspiration
Formål
At sikre aspiration af oocytter sker i overensstemmelse med Fertilitetsenheden, Aalborg Universitets Hospitals politik, mål og kravgrundlag i øvrigt.
Beskrivelse
Ansvar
Laboratorielederen har det overordnede ansvar for proceduren. I den daglige drift er laboratoriepersonale ansvarlig for, at nye medarbejder informeres og undervises i proceduren. Medarbejderen er herefter personlig ansvarlig for, at proceduren efterleves i praksis.
Apparatur, utensilier og reagenser
Apparatur | Utensiler | Reagenser |
Panasonic inkubator Stue 1: Micro Galaxy inkubator Sterilbænk L124, K-system Nikon Mikroskop SMZ1500 Stue 2: ESCO flowbænk og K-system Nikon Mikroskop SMZ1500 | 4-brøndsbakker Rundbundede reagensglas Varmeblokke Pipette 10-100 µl + sterile pipettespidser Til skyl: Grønt sterilt klæde 10 ml sprøjter | Fertiliseringsmedie Dyrkningsmedie 1 Olie Skyllemedie |
Fremgangsmåde
Klargøring lige før aspirationen:
• Alle 4-brøndsbakker med medium til brug ved aspiration (klargjort dagen i forvejen ifølge forskriften: "klargøring til aspiration") stilles i Micro Galaxy inkubatoren, hvis aspirationen sker på stue 1 med flowbænk L124, og i bordpladeinkubatorer, hvis aspiationen sker på stue 2 med ESCO flowbænken.
Aspiration med skyl:
• Forvarmet skyllemedie (ophældt i et forvarmet flushingbæger) trækkes op i 4 stk 10 ml sprøjter. Til PGT patienter trækkes medie op i 5 stk 10 ml sprøjter.
• Sprøjterne anbringes i den dertil indrettede varmeblok, og pakkes derefter ind i et sterilt grønt klæde. Sprøjter og blok opbevares varmt til patienten er klar.
• For PGT patienter med mindre end 15 follikler trækkes der altid op til skyl.
Aspiration uden skyl:
Klargøring på behandlerrum:
• Petriskåle stilles frem i den tændte sterilbænk på varmefladen ved siden af mikroskopet.
• Forvarmede rundbundede rør lægges på aspirationsbordet
• Opvarmede varmeblokke + ”hånd-blokken” stilles ligeledes på bordet
• Varmeblokken med de mediefyldte sprøjter/glas stilles frem til sygeplejersken
• Der tændes for CO2-pumpen i sterilbænken.
Selve aspirationen:
• Parrets navn og CPR-nummer kontrolleres før aspirationen påbegyndes.
• Starttidspunkt for aspirationen, stue nummer, samt initialer på bioanalytiker, sygeplejeske og læge noteres på dyrkningsskemaet.
• Al håndtering af oocytter foregår i sterilbænken. Der tages én 4-brøndsbakke ud ad gangen, og denne placeres under klokken eller i bordpladeinkubator efter, at det anførte navn og CPR-nr er kontrolleret.
• Den aspirerede follikelvæske hældes ud i petriskålen. Sørg omhyggeligt for, at det hele kommer med.
• Undersøg under stereomikroskop, om der findes oocytter. Hvis dette er tilfældet, gives straks besked til lægen og patienten.
• Oocytten føres fra petriskålen over i midten af 4-brøndsbakken.
• Der skylles grundigt ved at ”spole” ægget med dens cumulusceller nogle gange i mediet i midten af 4-brøndsbakken, så det er fri for erythrocytter. I denne proces kan det være en fordel at flytte oocyten undervejs til et nyt rent sted i midten af skålen. Efter så meget blod som overhovedet muligt er fjernet overføres oocyten til Hul 1
• Sæt bakken under glasklokken igen eller hvis der arbejdes i ESCO-bænken anbringes bakken i bordplade inkubator.
• Hvis oocyt-cumulus komplekset stadig er blodigt, kan det overføres til hul 2 for at undgå blodtilblanding i hul 1.
• Når der er 4 oocytter i brønd 1, sættes 4-brøndsbakken tilbage i Micro Galaxy/bordpladeinkubator inkubatoren.
• Fortsæt med næste 4-brøndsbakke
• Noter et x på dyrkningsskemaet for hver oocyt der er kommet i brønden. Har patienten flere oocytter, end der er gjort klar til, kan der fordeles mere end 4 oocytter i hul 1, eller de "ekstra" kan kommes i brønd 2. Under alle omstændigheder skal det tydeligt fremgå af patientens dyrkningsskema hvor mange æg der er aspireret, og hvor de er placeret. HUSK at gøre ekstra slides/dyrkningsskåle klar, hvis der brug for det.
• Det noteres på dyrkningsskemaet, om der er anvendt flushing (skylning) under aspirationen.
• Aspirationen lægges i Formatex med de relevante oplysninger. Sidst noteres CID# på dyrkningsskemaet.