Testikular spermaspiration (PRØVE-TESA)

Formål

At sikre, at udførelse af testikular spermaspiration (TESA) sker ensrettet og korrekt og i overensstemmelse med Fertilitetsenheden Aalborg Universitetshospitals politik, mål og kravgrundlag i øvrigt.

Beskrivelse

Baggrund, anvendelse og gyldighed

Proceduren omfatter alle laboratorieopgaver inden for testikular spermaspiration (TESA).

Ansvar
Den/de områdeansvarlige er ansvarlig(e) for, at medarbejderen informeres og undervises i procedurens indhold. Medarbejderen er herefter personligt ansvarlig for at proceduren efterleves i praksis.

 

Fremgangsmetode

Klargøring i sterilbænk L126:

• • Stativ med 1 tomt Falconglas mærket med patientlabel (fra BÅDE vir og uxor) + Falkonglas med gamet buffer er klargjort og står i varmeskab. Et rundbundede reagensglas med fertiliseringsmedie er klargjort og står i inkubator.

• • 2 petriskåle med patientlabel

• • Morter

• • Objektglas

• • Pipette 100-1000 µL + tilhørende spidser

Udtagning og behandling af testikelvæv

• • 0,5 ml vaskemedium afpipetteres i hver petriskål. Når patienten er klar, tager bioanalytikeren den ene petriskål med på behandlerrummet

• • Efter udtagelse af testikelvævet lægges dette i mediet i petriskålen af lægen, og skålen bringes straks til laboratoriet

• • Under mikroskop konstateres det, om det er tubuli-væv

• • Hvis vævsstykket er blodigt, kan det evt. skylles i mediet i den anden petriskål

• • Vævsstykket overføres med pipette eller pincet til morteren sammen med ca. 50 µL vaskemedium. Vævet mortres forsigtigt, men grundigt. (Når der ikke mortres, kan morteren stå i det tomme Falconglas)

• • En dråbe af mediet overføres til et rent objektglas og undersøges under mikroskop. Find kanten af dråben med objektiv x10, og led efter sædceller med objektiv x20.

Resultat af mikroskopi:

(Svaret afgives hurtigst muligt til lægen der selv vurderer den videre behandling afhængig af resultatet)

Ses der immotile sædceller i præparatet:

• • Alt indholdet fra morteren overføres til et Falconglas der er mærket med patientlabel (efterskyl morteren med fertiliseringsmedie et par gange), og overhældes med ca. 8 ml fertiliseringsmedie. Sættes i inkubator med lettet låg, til mikroskopi den efterfølgende dag. Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og føres i Statistikmappen under "Testesbiopsi"

Ses der motile sædceller i præparatet:

• • Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og føres i Statistikmappen under "Testesbiopsi".

• • Prøven kasseres.

Ses der ingen sædceller i præparatet:

• • Alt indhold overføres fra morteren til et Falconglas der er mærket med patientlabel (efterskyl morteren med fertiliseringsmedie et par gange), overhæld med ca. 5 ml fertiliseringsmedie. Falconglasset centrifugeres ved 2800 rpm i 10 min. Supernatanten suges fra, og pellet undersøges for sædceller under mikroskop ved at lægge en lille dråbe på et objektglas. Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og føres i Statistikmappen under "Testesbiopsi".

• • evt. tages en ny prøve – den videre procedure konfereres med lægen

Dagen efter (ved fund af immotile spermatozoer):

• • Supernantanten overføres til et nyt Falconglas mærket med patientlabel

• • Glasset centrifugeres 10 minutter ved 2800 rpm

• • Supernantanten suges fra

• • Pellet opslemmes i 1-2 dråber fertiliseringsmedie

• • Kontroller under mikroskop om der er sædceller. Benyt evt. ICSI-mikroskopet

• • Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og føres i Statistikmappen under "Testesbiopsi"