Testikular spermaspiration (PRØVE-TESA)
Formål
At sikre, at udførelse af prøve testikular spermaspiration (PRØVE-TESA) sker ensrettet og korrekt og i overensstemmelse med Fertilitetsenheden Aalborg Universitetshospitals politik, mål og kravgrundlag i øvrigt.
Beskrivelse
Baggrund, anvendelse og gyldighed
Proceduren omfatter alle laboratorieopgaver inden for testikular spermaspiration (TESA).
Ansvar
Biologen har det overordnede ansvar for proceduren. I den daglige drift er laboratoriepersonale ansvarlig for, at nye medarbejder informeres og undervises i proceduren. Medarbejderen er herefter personligt ansvarligt for at proceduren efterleves i praksis.
Fremgangsmetode
Klargøring i sterilbænk L126:
• Stativ med 1 tomt Falconglas mærket med patientlabel + Falkonglas med Gamete Buffer er klargjort og står i varmeskab. Et rundbundede reagensglas med fertiliseringsmedie er klargjort og står i inkubator.
• 2 petriskåle med patientlabel
• Morter
• Objektglas
• Dækglas
• Pipette 100-1000 µL + tilhørende spidser
Udtagning og behandling af testikelvæv
• 0,5 ml Gamete Buffer afpipetteres i petriskål. Når patienten er klar, tager bioanalytikeren petriskål med på behandlerrummet
• Hvis der skal sendes væv til patologisk undersøgelse, lægges testikelvæv i petriskålens låg og deles med kanyle. Den del af der skal sendes tager sygeplejersken sig af og den anden halvdel lægges i dråben med Gamete Buffer og bringes til laboratoriet.
• Hvis der ikke skal sendes væv til patologisk undersøgelse lægges hele biopsien i dråbe med Gamete Buffer og skålen bringes straks til laboratoriet
• Hvis vævsstykket er blodigt, kan det evt. skylles i en anden dråbe med Gamete Buffer.
• Under zoommikroskop kan der evt. konstateres om det er tubuli-væv
• Vævsstykket overføres med pipette eller pincet til morteren sammen med ca. 50 µL Gamete Buffer. Vævet mortes forsigtigt, men grundigt. (Når der ikke mortes, kan morteren stå i det tomme Falconglas)
• En dråbe mikroskoperes på objektglas med dækglas over. Find kanten af objektglas med objektiv x10, og led efter sædceller med objektiv x20.
Resultat af mikroskopi:
Svaret afgives hurtigst muligt til lægen der selv vurderer den videre behandling afhængig af resultatet. Evt. tages en ny biopsi
Ses der immotile sædceller i præparatet:
• Alt indholdet fra morteren overføres til et Falconglas der er mærket med patientlabel (efterskyl morteren med fertiliseringsmedie et par gange), og overhældes med ca. 8 ml fertiliseringsmedie. Sættes i inkubator med lettet låg, til mikroskopi den efterfølgende dag. Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og føres i Statistikmappen under "Testesbiopsi": Der noteres i hvilken side biopsien er taget.
Ses der motile sædceller i præparatet:
Ses der ingen sædceller i præparatet:
• Alt indhold overføres fra morteren til et Falconglas der er mærket med patientlabel (efterskyl morteren med fertiliseringsmedie et par gange), overhæld med ca. 5 ml fertiliseringsmedie. Falconglasset centrifugeres ved 2800 rpm i 10 min. Supernatanten suges fra, og pellet undersøges for sædceller under mikroskop ved at lægge en lille dråbe på et objektglas med dækglas over.
• Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og føres i Statistikmappen under "Testesbiopsi". Der noteres i hvilken side biopsien er taget.
• Svar lægges i Formatex og destruerer igen.
Dagen efter (ved fund af immotile spermatozoer):
• Supernantanten overføres til et nyt Falconglas mærket med patientlabel
• Glasset centrifugeres 10 minutter ved 2800 rpm
• Supernantanten suges fra
• Pellet opslemmes i 1-2 dråber fertiliseringsmedie og mikroskoperes på objektglas med dækglas over. Der undersøges om der er motile spermatozoer.
• Svaret noteres på patientens "TESA-skema" og i Statistikmappen under "Testesbiopsi" Der noteres i hvilken side biopsien er taget.
• Svar lægges i Formatex og destruerer igen.
