Klargøring til ICSI med medier fra Cook® Medical
Formål
At sikre korrekt klargøring af medier og utensilier forud for ICSI, så det sker i overensstemmelse med Fertilitetsenheden Aalborg Universtetshospitals politik, mål og kravgrundlag i øvrigt.
Definition af begreber
ICSI: Intra Cytoplasmatisk Sperm Injektion
Beskrivelse
Baggrund, anvendelse og gyldighed
Proceduren skal udføres dagen før den planlagte ICSI
Ansvar
Biologen har det overordnede ansvar for proceduren. I den daglige drift er laboratoriepersonalet ansvarlig for, at nye medarbejdere informeres og undervises i proceduren. Medarbejderen er herefter personligt ansvarlig for at proceduren efterleves i praksis.
Fremgangsmåde
Klargøring af utensilier:
• Der klargøres bakker til aspiration og efterfølgende dyrkning, som beskrevet i proceduren herfor. Desuden skal følgende klargøres:
• Én denuderingsskål pr. 4 oocytter
• Skålene skal forsynes med patientlabel på både låg og bund
• Rundbundede reagensglas til olie (et glas til to ICSI skåle + ét ekstra)
• Ét centrifugeglas med Gamete-buffer
• Glassene påklistres labels med medienavn samt dato for ophældning
Ophældning og afpippetering af medier
Udføres i sterilbænk
• I denuderingsskålen afpipetters over stregen 3 dråber med 40 µl cumulase
• Under stregen afpipetteres 8-12 dråber med 25 µl fertiliseringsmedie
• Dråberne overlejres med 6,5 ml olie
• Der ophældes olie i de klargjorte olieglas (ca 4 ml. pr. forventet ICSI-skål)
• Der ophældes ca. 1 ml Gamete-buffer i det dertil klargjorte glas
• Denuderingsskåle samt olieglas (med lettet låg) stilles i standard inkubator til ækvilibrering
• Glasset med Gamete-buffer sættes til opvarmning i varmeskab natten over med fastskruet låg
Klargøring af ICSI skålen udføres på dagen for ICSI proceduren:
ICSI skålen laves således:
• Én ICSI-skål pr. 4 æg påklistres patientlabel på låget
• I midten af skålen afpippetteres 8-10 µl PVP (fra køleskab) i en dråbe
• Afpippetter 4 dråber á 8-10µl af det opvarmede Gamete-buffer omkring PVP dråben, efter princippet kl. 12, 3, 6, 9
• Der overlejres med ækvillibreret olie, så dråberne er dækket
• ICSI skålen placeres i inkubator indtil brug