Klargøring til warming af vitrificerede embryoner/blastocyster i HSV strå (Vit Kit®-Thaw)
Formål
At sikre, at klargøring til warming af vitrificerede embryoner/blastocyster i HSV strå, sker i overensstemmelse med Fertilitetsklinikkens politik, mål og kravgrundlag i øvrigt.
Beskrivelse
Baggrund, anvendelse og gyldighed
Proceduren omfatter warming af embryoner/blastocyster efter vitrification i HSV strå med Vit Kit®-Freeze medie fra Irvine Scientific. Det efterstræbes at der efter warming findes minimum ét embryoner/én blastocyst der sandsynligvis er transferabelt dagen efter warming, hvorfor det kan være nødvendigt at warme flere strå. I øvrigt kan andre forhold gøre sig gældende for antallet af strå der skal warmes.
Ansvar
Biologen har det overordnede ansvar for proceduren. I den daglige drift er laboratoriepersonale ansvarlig for, at nye medarbejder informeres og undervises i proceduren. Medarbejderen er herefter personligt ansvarligt for at proceduren efterleves i praksis.
Apparatur, utensilier og reagenser
Fremgangsmetode
Udportionering Vit-Kit®-Thaw medie
Det efterstræbes at der altid findes udportionerede vials med Vit-Kit®-Thaw medie. Udportioneringen skal udføres i sterilt i 3*16 cryovials fra Eppendorf. Vials mærkes med mediets forkortelse (TS, DS eller WS), samt dato for udportionering. Holdbarhed efter udportionering er 8 uger. Afpipetter volumen af de tre medier således:
TS: 400 µl i 16 glas
DS: 100 µl i 16 glas
WS: 180 µl i 16 glas
Opbevares i køleskab
Klargøring af utensilier
• Patientens vitrifikationsskema findes frem. Der skal laves en Thaw-skål/centerwell, en Dil/wash-skål og en Skyl/Blast-bakke for hvert strå der skal warmes (se evt. nedenstående oversigtstegning) Til blastocyster skal der desuden klargøres en slide med blastocystmedie (se under klargøring til aspiration hvordan sliden klargøres)
• Alle skåle og bakker forsynes med patientlabels på både bund og låg
• Thaw-skålen mærkes ”TS” øverst på låget
• Dil/wash-skålen mærkes under bunden med DS, DS og WS, WS (se tegning)
Klargøring til warming af dag 2 og 3 embryoner der skal dyrkes til næste dag
• Blast-bakken mærkes foroven med ”Fer trans/”, hul 1 mærkes med ”S”, hul 2, 3 mærkes med (embryonr.) 1, 2 og og hul 4 (transfereringshullet) mærkes med en firkant
Klargøring til warming af blastocyster
Ophældning og afpippetering af medier (dag 2 og 3 embryoner der skal dyrkes en dag):
• Der fyldes 500 µl blastocystmedie i alle 4 huller i blast-bakken (undlad hul 3, hvis der kun skal warmeas ét embryon).
• De tre første huller overlejres med 400 µl olie – IKKE transfereringshullet
• Bakkerne stilles til ækvilibrering i inkubator natten over.
Ophældning og afpippetering Af medier (blastocyst)
