Klargøring til ICSI med medier fra Irvine
Formål
At sikre klargøring af medier og utensilier forud for ICSI sker i overensstemmelse med Fertilitetsenheden Aalborg Universitetshospitals politik, mål og kravgrundlag i øvrigt.
Definition af begreber
ICSI: Intra Cytoplasmatisk Sperm Injektion
Beskrivelse
Baggrund, anvendelse og gyldighed
Proceduren omfatter klargøring af utensilier og medier til ICSI og skal udføres dagen før den planlagte ICSI.
Ansvar
Laboratorielederen har det overordnede ansvar for proceduren. I den daglige drift er laboratoriepersonalet ansvarlig for, at nye medarbejdere informeres og undervises i proceduren. Medarbejderen er herefter personlig ansvarlig for, at proceduren efterleves i praksis.
Fremgangsmåde
Klargøring af utensilier:
1. Der klargøres bakker til aspiration og efterfølgende dyrkning, som beskrevet i proceduren herfor. Desuden skal følgende klargøres:
2. En denuderingsskål pr. 4 oocytter.
3. Denuderingsskålen skal forsynes med patientlabel på både låg og bund.
4. Et centrifugeglas med MHM medie (kan bruges til flere patienter).
5. Glassene påklistres labels med medienavn samt dato for ophælding.
Ophælding og afpipettering af medier:
Udføres i sterilbænk
6. I denuderingsskålen afpipetteteres 3 dråber med 40 µl cumulase over stregen.
7. Under stregen afpipetteres 8-12 dråber med 25 µl CSCM dyrkningsmedie.
8. Dråberne overlejres med 6,5 ml olie.
9. Der ophældes ca. 1 ml MHM medie i det dertil klargjorte glas.
10. Denuderingsskåle stilles i CO2 inkubator til ækvilibrering.
11. Glasset med MHM medie sættes til opvarmning i varmeskab natten over med tætlukket låg.
Klargøring af ICSI skålen udføres på dagen for ICSI proceduren
ICSI skålen laves således:
12. En ICSI-skål pr. 4 oocytter påklistres patientlabel på låget.
13. I midten af skålen afpipetteres 8-10 µl PVP (fra køleskab) i en dråbe.
14. Afpipetter 4 dråber af 8-10 µl af det opvarmede MHM medie omkring PVP dråben, efter princippet kl. 12, 3, 6, 9.
15. Der overlejres med opvarmet olie, så dråberne er dækket.
16. ICSI skålen placeres i inkubator indtil brug.